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金黃色葡萄球菌的測試片檢驗方法

方法編號：5042 

1 適用范圍：可用于各類食品和原料中金黃色葡萄球菌的檢測以及突發事件應急需要。

2 方法原理：將選擇性培養基中加入專一性的酶顯色劑，并將其加載在紙片上，通過培養，如果樣品中含有黃色葡萄球菌，即可在紙片上呈現紫紅色的菌落。

3 操作方法

3．1 樣品處理：無菌操作取25g（25mL）樣品放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯內，充分振搖或置均質器中制成樣品勻液，靜置片刻。

3．2接種：將測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個樣品接種兩片。

3．3培養：將加了樣的測試片疊放在一起，放入原來的自封袋中，堆疊片數不超過12片，透明膜向上平放在37℃培養箱內培養15h～24h。

3．4 結果觀察：對測試片進行觀察，紫紅色菌落為金黃色葡萄球菌，大腸埃希氏菌，普通大腸桿菌呈藍色菌落，而溶血性鏈球菌，沙門氏菌，變形桿菌在試片上不生長。

4 附加說明

4．1山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明，當金黃色葡萄球菌在0～9個菌落范圍內時，測試片與血平板均能檢出，作為致病菌不得撿出的標準要求，可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。

4．2 本法還可應用于從業人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測，用取樣棉簽涂抹被測物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測試片上。

4．3試驗后紙片應及時按生物安全要求進行無害化處理。

4．4出現陽性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的話至少再取樣重復檢驗一次。